الماسح الضوئي الرقمي للشرائح

يساعد المسح الرقمي للشرائح عمل علماء الأمراض والباحثين بعدة طرق، فالشرائح الرقمية سهلة التخزين والاسترجاع والعرض والتحليل. ومع ذلك، لا يمكن لعلماء الأمراض والباحثين الاستمتاع حقًا بهذه الفوائد إلا إذا كانت الشريحة الرقمية تتمتع بجودة الصورة المناسبة.

بالنسبة للمسح الضوئي أحادي الطبقة، نوصي بسمك قياسي للأنسجة يبلغ 7-10 ميكرومتر. إذا كانت لديك عينات أكثر سمكًا، فسيؤدي المسح البؤري الممتد أو المسح الضوئي على شكل Z إلى الحصول على أفضل النتائج. تجنب تلطيخ شاحب أو تلطيخ خلفية قوية لأنها من المحتمل أن تعيق الكشف الآلي عن الأنسجة. تنتج ماسحات الشرائح الرقمية أفضل النتائج مع أسطح الأنسجة المسطحة. تجنب أي طيات أو تجاعيد في الأنسجة للحصول على التركيز الأمثل. استخدم أيضًا شرائح ذات أحجام قياسية (طول 75-76 مم وعرض 25-26 مم للشرائح القياسية أو عرض 51-52 مم للشرائح مزدوجة العرض). يمكن استخدام كل من الأغطية الزجاجية والبلاستيكية. ومع ذلك، تأكد من أن الغطاء البلاستيكي غير ملتوي أو متجعد لأن ذلك قد يؤثر على تركيز الماسح الضوئي. تأكد أيضًا من عدم وجود فقاعات هواء تحت غطاء الغطاء، لأن هذا قد يؤدي أيضًا إلى مسح المناطق خارج نطاق التركيز. للحصول على أفضل النتائج، يجب أن تكون المسافة بين حواف الشريحة وحواف الغطاء المثبت 1-2 مم، ويجب أن تكون الحواف متوازية مع بعضها البعض. أحجام ساترة الموصى بها هي الحد الأقصى. الطول 50 ملم والحد الأقصى. عرض 24 ملم للشرائح القياسية أو الحد الأقصى. عرض 50 ملم للشرائح ذات العرض المزدوج. في حالة استخدام هدف 40x، قم بضبط حلقة الارتباط لسمك ساترة. عند لصق باركود على الشريحة الزجاجية، تأكد من بقاء مسافة هامشية تبلغ 1-2 ملم على جميع الجوانب بين الملصق والحدود الخارجية لمنطقة الملصق. لا تدع ملصق الباركود يبرز من حواف الشريحة أو يلتصق على سطح غطاء الغطاء. لا تقم بلصق أكثر من 4 ملصقات باركود فوق بعضها البعض ويجب أن يظل السمك الإجمالي أقل من 1.65 ملم (بما في ذلك الباركود والشريحة). إذا كان الماسح الضوئي يستخدم تقنية الفلاش، فإن اتجاه العينة يؤثر أيضًا على سرعة المسح. للحصول على أفضل النتائج، يجب أن تكون العينة موجهة عموديًا لأن الخطوط تُقرأ في اتجاه عمودي.

للحصول على أفضل النتائج، يرجى فحص الشرائح الزجاجية وتنظيفها جيدًا قبل تحميلها في الماسح الضوئي. قد يؤثر أغطية الغلاف المتدلية أو ملصقات الباركود أو الغراء الزائد على ملاءمة الشريحة في المجلة أو آلية المسح الضوئي نفسها، مما قد يتسبب في حدوث تشويش أو كسر أو جودة الصورة رديئة. قبل إجراء المسح الضوئي، تأكد من مسح الشرائح الزجاجية وتنظيفها من بقع الماء أو بصمات الأصابع. لمزيد من البقع العنيدة، استخدمي الماء أو الكحول. لا تقم بتحميل شرائح زجاجية غير جافة تمامًا في المجلة، وإلا فقد يدخل الماء أو وسط التضمين إلى آلية المسح، مما يتسبب في انخفاض جودة الصورة. إذا كنت بحاجة إلى تحديد منطقة مهمة على الشريحة الزجاجية، فلا تستخدم علامة قد تخدش السطح الزجاجي للشريحة. استخدم قلمًا ناعمًا بدلًا من ذلك. يرجى ملاحظة أن بعض أقلام التحديد قد تذوب في الماء؛ ضع في اعتبارك عدم استخدام هذه الأغراض مع أهداف الغمر في الماء. لا تستخدم الشرائح الزجاجية التي تحتوي على أي شقوق أو قد تسقط قطع صغيرة من الزجاج أثناء المسح الضوئي، مما يتسبب في حدوث انحشار أو حتى احتمال تلف آلية المسح الضوئي. تأكد من أن الشرائح الزجاجية في وضع مستقيم في المجلة وإلا فمن المحتمل جدًا أن تحتوي شرائحك الرقمية على مناطق غير مركزة. يرجى الحفاظ على المجلات نظيفة من الغبار والزجاج المكسور وغيرها من بقايا الوسائط المضمنة. لن يعمل محمل الشرائح بأمان وبشكل صحيح إلا مع المجلات النظيفة.

هناك العديد من الماسحات الضوئية للشرائح الرقمية في السوق، ولكل منها خصائصها الخاصة. ومع ذلك، هناك بعض الإرشادات العامة لتحقيق جودة مسح ضوئي فائقة. يجب أن يحتوي الماسح الضوئي الخاص بك على ميزة الكشف التلقائي عن الأنسجة، مع التركيز على الأنسجة الموجودة على الشريحة واستبعاد جميع الكائنات الأخرى غير ذات الصلة. ومع ذلك، تلطيخ دون المستوى المطلوب، أو تغير اللون أو البقع على الشرائح قد يؤدي إلى ضعف الكشف عن الأنسجة. من المستحسن مراجعة اكتشاف الأنسجة على الشرائح دون المستوى الأمثل قبل المسح لتجنب الحاجة إلى إعادة الفحص لاحقًا. يجب أن يكون التركيز تلقائيًا مع وضع نقاط التركيز تلقائيًا في جميع أنحاء عينة الأنسجة. إذا كانت هناك مناطق خارج نطاق التركيز على الشريحة، فقد يكون من المفيد تعيين نقاط تركيز إضافية يدويًا. بالنسبة للمسح الضوئي تحت الماء، تأكد من وجود ما يكفي من الماء لمنع الهدف من الجفاف أثناء المسح. ومع ذلك، إذا كان هناك الكثير من الماء، فيمكن أن يتسرب تحت غطاء الغطاء، مما يؤدي إلى جودة صورة دون المستوى المطلوب. بعد إجراء المسح الضوئي، استخدم صورة المعاينة الكاملة المحفوظة في الشريحة للتحقق مما إذا كان قد تم مسح كل منطقة ذات صلة ضوئيًا وتحديد أخطاء المسح المحتملة.

تعمل الماسحات الضوئية للشرائح الرقمية على مبدأ التقاط الصور أو المستندات المادية وتحويلها إلى بيانات رقمية يمكن تخزينها وتحريرها وعرضها على جهاز كمبيوتر أو أجهزة إلكترونية أخرى. تبدأ عملية الماسح الضوئي للشرائح الرقمية بإضاءة المستند أو الصورة المراد مسحها ضوئيًا. يتم استخدام مصادر الضوء، مثل مصابيح LED أو مصابيح الفلورسنت، لإضاءة سطح المستند. عندما تتم إضاءة المستند، فإنه يعكس أو ينقل الضوء بشكل مختلف حسب محتواه. في حالة الماسح الضوئي المسطح، ينعكس الضوء على سطح المستند. بالنسبة للمستندات أو الشرائح الشفافة، يمر الضوء عبر المادة، ويقوم الماسح الضوئي بالتقاط الضوء المنقول. تم تجهيز الماسحات الضوئية بالبصريات، والتي تتضمن عادةً مجموعة من العدسات والمرايا. تقوم البصريات بتركيز الضوء المنعكس أو المنقول على أجهزة الاستشعار. في معظم الماسحات الضوئية، يتم استخدام أجهزة استشعار الجهاز المزدوج الشحن (CCD) أو مستشعر الصور المتصل (CIS) للكشف عن الضوء. تقوم المستشعرات بتحويل الضوء المكتشف إلى إشارة كهربائية تمثل شدة الضوء عند نقاط مختلفة في المستند. تقوم هذه العملية بإنشاء تمثيل رقمي للصورة أو المستند، يسمى الصورة النقطية.

الإشارات الكهربائية التي تولدها أجهزة الاستشعار هي إشارات تناظرية. ولجعلها قابلة للاستخدام بواسطة أجهزة الكمبيوتر، يجب تحويلها إلى بيانات رقمية. يتم استخدام المحول التناظري إلى الرقمي (ADC) لتحويل الإشارات التناظرية إلى بيانات رقمية تتكون من وحدات بكسل ذات معلومات محددة عن اللون والسطوع. بمجرد الحصول على الصورة الرقمية، قد تخضع لمزيد من المعالجة لتحسين جودتها. يمكن أن تتضمن تقنيات معالجة الصور تصحيح الألوان وتقليل الضوضاء وتحسينات أخرى. يتم بعد ذلك إرسال البيانات الرقمية المعالجة إلى جهاز كمبيوتر أو أجهزة إخراج أخرى، حيث يمكن عرضها على الشاشة، أو حفظها كملف، أو طباعتها.

قد تحتوي الأنواع المختلفة من ماسحات الشرائح الرقمية على خطوات إضافية أو ميزات محددة وفقًا للغرض المقصود منها. على سبيل المثال، تستخدم الماسحات الضوئية ثلاثية الأبعاد طرقًا متخصصة لالتقاط معلومات ثلاثية الأبعاد حول الكائنات، بينما تستخدم ماسحات الباركود الضوئية أشعة الليزر أو مستشعرات الصور لقراءة معلومات الباركود. المبدأ الأساسي وراء جميع الماسحات الضوئية هو تحويل الصور أو المستندات المادية إلى بيانات رقمية للتخزين والمعالجة والعرض على الأجهزة الإلكترونية.